文章核心观点 - CAR-T细胞疗法在癌症治疗领域是重大突破，但在疗效上面临T细胞耗竭、增殖有限及肿瘤免疫抑制环境等多重障碍 [3] - 两项发表于《自然》杂志的最新研究，通过体内CRISPR筛选技术，系统性发现了能显著增强CAR-T细胞抗癌功能的基因靶点 [3] - 奥地利科学院的研究发现RHOG基因敲除是增强CAR-T细胞功能的强效手段 [7][8][9] - 哈佛医学院的研究鉴定出CDKN1B是限制CAR-T细胞持久性的关键因素，其敲除可显著提高肿瘤清除率和生存率 [10][11][12] 奥地利科学院分子医学研究中心研究总结 - 研究团队开发了CELLFIE平台，这是一个用于在多个临床目标上增强CAR-T细胞的CRISPR筛选平台 [8] - 研究流程包括在人类原代CAR-T细胞中进行全基因组筛选，覆盖T细胞增殖、活化、耗竭等关键生物学方面，随后在人类白血病异种移植小鼠模型中进行体内优先级排序 [8] - 最关键发现是RHOG基因敲除作为一种强大且意料之外的CAR-T细胞增强方式，在多种体内模型、CAR设计和供体样本中均得到验证 [8][9] - RHOG基因敲除的CAR-T细胞在广泛使用的基准测试中优于标准CAR-T细胞，为优化细胞免疫疗法奠定了基础 [9] 哈佛医学院麻省总医院研究总结 - 研究团队对靶向B细胞成熟抗原的CAR-T细胞进行了体内功能缺失的CRISPR筛选，以研究在多发性骨髓瘤模型中影响CAR-T细胞持久性的基因 [10][11] - 筛选追踪了从制造到在肿瘤中存活的基因修饰CAR-T细胞表现，揭示了不同基因在不同时间和环境下对CAR-T细胞功能的调控作用 [11] - 研究发现RASA2和SOCS1缺失增强体外T细胞扩增，PTPN2、ZC3H12A和RC3H1缺失赋予体内早期生长优势 [11] - 最关键发现是细胞周期调控因子CDKN1B被确定为体内晚期时间点CAR-T细胞适应性的最重要限制因素，敲除CDKN1B可增加增殖和效应功能，显著提高肿瘤清除率和总体生存率 [11][12]